“Bioline,siRNA转染试剂,假病毒包装,荧光定量PCR试剂,唾液DNA提取试剂”/

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荧光定量PCR实验注意避免交叉污染!
发布者:百代生物  来源:  发布时间:2017-11-25


正确的实验技巧是成功的荧光定量PCR反应重要然而常被忽视的要素。为得到最佳的实验结果,实验人员要尽可能减少样品间交叉污染的可能,避免将核酸从一个实验带入下一个实验。


以下措施有助于避免实验污染问题:

1.用稀释的漂白剂或净化剂抹擦工作台

2.在指定地配有紫外灯的超净室、罩式或台式超净台中准备样品,理想的条件是样品准备与PCR扩增分开在不同的区域,注意避免质粒或扩增子污染样品准备区,绝不要将扩增后产物带入指定洁净区

3.在样品准备和配制反应液过程中勤换手套

4.使用轴防护装置的移液器和带滤芯的移液器头

5.勤用稀释的漂白剂清洁移液器

6.只使用PCR级的水和PCR专用试剂进行PCR实验

7.用带旋盖的EP管稀释和配制反应液


注意:

在进行PCR实验时,还应准备一个无模板的对照来验证有无污染发生,而且用热启动酶防止反应开始之前的非特异性扩增。

 

为最小化实验结果的统计学偏差,先制备混合反应液,建议所有样本有三个重复。

 

大剂量包装的反应试剂,使用前进行分装,尽量减少试剂的反复冻融。


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