“Bioline,siRNA转染试剂,假病毒包装,荧光定量PCR试剂,唾液DNA提取试剂”/

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介绍DNA膜吸附柱法
发布者:百代生物  来源:  发布时间:2018-2-28

核酸提取试剂(DNA膜吸附柱法)

【产品名称】

核酸提取试剂

【包装规格】 25人份/盒、50人份/盒、100人份/盒

【货号】C25、C50、C100

【预期用途】

本试剂适用于带有口腔、鼻(咽)、尿道、阴道、肛分泌物或粘液的拭子,痰液,疱疹液等临床样本中细胞/病毒DNA的提取,提取后的DNA可用于临床体外分子生物学检测使用。

【检测原理】

本试剂采用硅胶膜离心吸附柱特异性结合DNA,洗脱液洗脱去除杂质,得到高纯度DNA。硅胶吸附柱高效、专一吸附DNA,可最大限度去除蛋白质和其他杂质。

 

                

【储存条件及有效期】

常温(10-30℃)贮存,有效期12个月。

消化液请于-20℃存放(建议第一次溶解后分装,于-20℃保存,避免反复冻融)。

【样本要求】

样本应为带有各种口腔、泌尿生殖道分泌物或粘液的拭子及痰液样本,不得使用血液或组织样本。

样本采集后若不立即检测,应-20℃保存,有效期4个月,或-70℃长期保存。

样本应避免反复冻融。必要时,应分装保存。

【检验方法】

1.    请自行准备:无水乙醇、1.5mL离心管及生理盐水。

2.    取出析出液,按以下操作:

a) 25人份/盒加11.3mL无水乙醇;50人份/盒加入22.7mL无水乙醇;100人份/盒加入45.3mL无水乙醇。

b) 配制好的析出液如出现沉淀,可在37℃溶解,摇匀后使用。

3.    样本处理:

a) 拭子:向1.5mL离心管中加入800μL生理盐水,将拭子收集的样本置于生理盐水中,涮洗20秒,使细胞完全脱落,贴离心管壁挤干拭子上的液体,12,000 rpm 离心5 min,弃除部分上清,剩余100μL上清,充分振荡混匀15秒。

   b) 痰液:向收集的痰液中加入4倍体积1M NaOH,室温放置30分钟,每10分钟振荡混匀一次,12,000 rpm离心5 min,弃上清,加入0.5mL生理盐水,混匀,12,000 rpm离心5 min,弃400 μL上清,剩余100μL上清,充分振荡混匀15秒,。

4.    加入200μL 裂解液和20μL 消化液,振荡混匀,56℃水浴10 分钟。

5.    加入500μL析出液,轻轻颠倒混匀,如有半透明悬浮物,不影响DNA的提取与后续实验。

6.    将吸附柱放入收集管内,将上述溶液转入吸附柱内,静置2 min,12,000 rpm 4℃离心1 min,弃收集管内废液。

7.    将吸附柱放回收集管内,12,000 rpm 4℃离心2 min,离去残留的废液。

8.    取出吸附柱,放入新的1.5 mL 离心管内,加入40 μL 洗脱液,静置3 min,12,000 rpm 4℃ 离心2 min,收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步实验或-20℃保存。

【检验方法的局限性】

本试剂不适用于血液或组织样本中的DNA的提取。

【产品性能指标】

1.纯度:吸光度比值:2.1≥OD260/OD280≥1.6。

2.精密度:变异系数(CV)不大于10%。

【注意事项】

1.使用前请认真阅读本说明书全文,并按要求仔细操作。

2.操作人员应经过专业培训并具有一定经验。

3.作业过程需穿戴干净的手套、口罩。

4.实验所用的离心管、吸头等耗材均需保证DNase free。

5.作业过程宜在通风橱或生物安全柜内进行,实验后应立即清洁工作台。

6.产品使用前,低温保存的应恢复到室温,试剂应充分混匀。

7.超出有效期的产品请勿使用;不同批号的试剂切勿混用。

8.相关实验材料废弃时,应严格执行《医疗废物管理条例》和《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》的相关要求。


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